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萤火虫的发光部位主要集中在腹部末端,成虫的发光器位于腹部最后2-3节,雌性通常更明显(如第6腹节),雄性可能仅有两节发光器。

通常来说,萤火虫通过冷光反应发光,能量转化效率极高(几乎不产热),荧光素在荧光素酶催化下与氧气、ATP反应,生成氧化荧光素并释放光能(波长多为黄绿色或橙色)。发光频率和颜色因物种而异,用于种内识别。
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