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蟾蜍皮肤分泌的蟾毒素具毒性和辛辣味，多数动物避之不及，但少数天敌演化出应对能力。蛇类中部分游蛇科（如王锦蛇）对毒素耐受性强，通过缠绕压制蟾蜍，避开头部毒腺；鹭科鸟类（如苍鹭）用长喙叼住蟾蜍后甩动身体，避免毒液溅入眼鼻。
狐狸、果子狸等哺乳动物会撕咬蟾蜍腹部柔软部位；刺猬则用尖刺保护自己，翻转蟾蜍啃食内脏。此外，淡水龟类会捕食幼蟾或蝌蚪。蟾蜍毒素对小型动物致命，故天敌较少，这一防御机制使其在陆地生态中得以成功生存。
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