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孔雀鱼雄鱼和雌鱼可以通过以下三个方面进行区分：
体形大小：孔雀鱼雄鱼的体形通常比雌鱼小，而雌鱼则相对较大，特别是肚子部分。即将生产的雌鱼肚子会特别大，而雄鱼的体形和肚子部分都比雌鱼小很多。
颜色艳丽程度：公孔雀鱼身体的色彩更丰富，颜色比母孔雀鱼更艳丽一些，而母孔雀的主要任务是繁殖下一代，相对公孔雀鱼来说，就没有那样艳丽的色彩了。
胎斑：胎斑是母孔雀鱼独有的特征，在母孔雀鱼腹部靠过肛门处有一块颜色较深的地方，这就是母孔雀鱼的胎斑。母孔雀鱼越是要到了生产的时候，胎斑颜色就会越发的明显。
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