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将龟龟的尾巴拉直，泄殖孔位置超过尾盾边缘，则公龟的成分居高。大部分物种的公龟体型都比母龟小，海岛型陆龟加拉巴戈、亚达伯拉和苏卡达则相反。
有些物种的公母体型大小差异性不大，如辐射龟、红腿龟、黄腿龟等。大部分物种的公龟都比较活泼好动，母龟则较沉稳。大部分物种的公龟到了成熟期，均会有主动嗅对方泄殖孔确认性别的举动。并不是陆龟出生之后就可以鉴别雌雄了，陆龟不同于其他种类的生物，雌雄并不会很明显，只有体重达到一定重量后，才可以开始鉴别雌雄，而且越小的龟鉴别起来越不准确，所以想要知道龟的公母，也不能过于着急。
龟孵化时的温度决定龟的性别，所以人工繁殖时，也可以根据这个特性，去控制龟的性别。
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